Практична Молекулярна Біологія - головна сторінка.
 > Протоколи > Середовища

Середовища, вітаміни та ін


  Русская версия
Русская версия

  English version
English version


  Deutsche Version
Deutsche Version

Головна сторінка
Проект
Протоколи
Обчислення
BioMail
Учасники




Rambler's Top100
 

 
    Про перерахунок рецептів на довільний об'єм:



    Середовища

    LB, LTB

    pH 7.0; p=1.024

     Stock100ml150ml200ml300ml600ml750ml
    1.Bactotryptoneтвердий1g1.5g2.0g3.0g6.0g7.5g
    2.Bacto Yeast extr.твердий0.5g0.75g1.0g1.5g3.0g3.75g
    3.NaClтвердий1.0g1.5g2.0g3.0g6.0g7.5g
    4.H2OmQ95.3g143g190.7g286g572g715g
    5.agar topтвердий0.65g0.98g1.3g1.95g3.90g4.88g
    6.agar bot.твердий1.5g2.3g3.0g4.5g9.0g11.3g
    7.NaOH10N16.7µl25µl33.4µl50µl100µl125µl
    8.MgSO41M1ml1.5ml2.0ml3.0ml6.0ml7.5ml

    LTB: p.1, 3, 4, 7, 8.
    LB: p.1, 2, 3, 4, 7.
    LB/Mg: p.1, 2, 3, 4, 7, 8.

  • після автоклавування краще агар перемішати. Інакше він затвердне як гетерогенна речовина (більш щільна на дні).

  • LB (low salt)

    Для середовища, що містить Zeocine; pH 7.0

    Stock100ml150ml200ml300ml600ml750ml
    Bactotryptoneтвердий1g1.5g2.0g3.0g6.0g7.5g
    Bacto Yeast extr.твердий0.5g0.75g1.0g1.5g3.,0g3.75g
    NaClтвердий0.5g0.75g1.0g1.5g3.,0g3.75g
    H2OmQ95.3g143g190.7g286g572g715g
    NaOH10N16.7µl25µl33.4µl50µl100µl125µl

    M9

    10x

    Конц.Stock50ml75ml100ml
    Na2HPO4x 12 H2O48mM358.14g/M8.60g12.90g17.19g
    KH2PO422mM136.09g/M1.50g2.25g3.00g
    NaCl8.5mM58.44g/M0.25g0.38g0.50g
    NH4Cl18.7mM53/49g/M0.50g0.75g1.00g

    M9:

    Конц.Stock100ml150ml200ml
    M91x10x10ml15ml20ml
    Глюкоза0.4%10%4ml6ml8ml
    H2O cтеp.86ml129ml172ml

    додати додаткові компоненти:

    thiamine1mM1M100µl150µl200µl
    MgSO41mM1M100µl150µl200µl
    CaCl20.1mM1M10µl15µl20µl
  • у середовише для чашок Петрі необхідно додати 3% агару.

  • NZY

    1 L200ml
    NZ amine10g2g
    NaCl5g1g
    Bacto Yeast extr.5g1g
    MgSO4xH2O2g0.4g
    H2O950ml190ml

    SOC, SOB

    (зберігати при NT).

    Stock200ml400ml
    Bactotryptone 4.0g8.0g
    Bacto Yeast extr. 1.1g2.2g
    NaCl5M0.4ml0.8ml
    KCl1M2.0ml4ml
    H2O ~196ml~391ml
    1. після автоклавування дати охолонути до <60oC;
    2. додати
    3. 0.01V 2M Mg2+{= 1M MgCl2 + 1M MgSO4}  
      0.01V 2M глюкоза;  

    4. стерилізація через 0.2µm фільтр;
    5. зберігати при -20oC, (-70oC) у малих аліквотах.

    SOB - той самий розчин без глюкози.


    Terrific Broth

    pH 7.0

    100ml150ml200ml300ml667ml
    Bactotryptone1.2g1.8g2.4g3.6g8.0g
    Bacto Yeast extr.2.4g3.6g4.8g7.2g16.0g
    Гліцерол0.4ml
    0.504g
    0.6ml
    0.757g
    0.8ml
    1.009g
    1.2ml
    1.513g
    2.667ml
    3.362g

    H2O to V90ml135ml180ml270ml600ml
    додати після автоклавування:
    KPO4, pH7.0 1.0M10ml15ml20ml30ml66.7ml

    YENB

    pH 7.5: (середовище, що не містить солі, для приготування електро-компетентних клітин).

    Конц.Stock0.45 L0.5 L0.9 L1.0 L
    Bacto Yeast extr.0.75%твердий3.4g3.75g6.75g7.5g
    Nutrient Broth0.8%твердий3.6g4.0g7.2g8.0g
    NaOH 10N~243 µl~270 µl~490 µl~540 µl

    2 YT

    %(w/w)200ml1L
    Bactotryptone1.63.2g16g
    Bacto Yeast extr.1.02g10g
    NaCl0.51g5g
    H2O96.9193.8ml969ml

    Інші речовини

    IPTG

    C6H18O5S; Mw=238.3g/M;

    Конц.1ml5ml10ml
    IPTG200mg/ml0.2g1.0g2.0g
  • стерилізація через 0.2µm фільтр;
  • зберігати сухий порошок при 4oC, розчин у H2O при -20oC;
  • - для плазмід - на 80mm чашку Петрі ~4µl,
    - для М13 - на 3ml верхнього агару ~1-4µl.


    X-Gal

    C14H15BrClNO6 Mw= 408g/M;

    Конц.1ml5ml10ml
    X-Gal20mg/ml (2%)20mg0.1g0.2g
  • зберігати сухий порошок при 4oC у темряві; розчин - при -20oC у темряві (у DMFA (або у DMSO з тим самим результатом)).
  • - для плазмід - на 80mm чашку Петрі 40µl,
    - для M13 - на 3ml верхнього агару 40µl.


    Глюкоза

    C6H12O6 Mw=180.16;

    Конц.Stock5ml10ml50ml100ml150ml200ml
    C6H12O61M180g/M0.90g1.80g9.01g18.02g27.03g36.03g
  • стерилізація через 0.2µm фільтр.

  • Мальтоза

    100х розчин середовища для бактеріофагу лямбда;

    Конц.Stock10ml50ml100ml
    Мальтоза20%твердий2g10g20g
  • стерилізація через 0.2µm фільтр.

  • Тиамін

    Вітамін B1 Анеурін; C12H17ClN4OSxHCl; Mw=337.3g/M;

    Конц.Stock1ml5ml10ml25ml
    C12H17ClN4OSxHCl1M337.3g/M0.337g1.69g3.37g8.43g
  • стерилізація через 0.2µm фільтр.

"Практична Молекулярна Біологія" http://molbiol.ru/ukr
e-mail: editor@molbiol.ru



Line

на початок
на початок

 

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---


      molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов    Rambler