Главная страница MolBiol.ru > Растворы > Прописи > Бактериальные среды Rambler's Top100  English version  Deutsche Version  Український варіант
ГЛАВНАЯ · ПРОЕКТ · СПРАВОЧНИК · МЕТОДЫ · РАСТВОРЫ · РАСЧЁТЫ · ЛИТЕРАТУРА · ЗАДАЧИ · FULL TEXT · ОРГ.ВОПРОСЫ · WEB
ФИРМЫ · КАРТА САЙТА · COFFEE BREAK · КАРТИНКИ · РАБОТЫ И УСЛУГИ · БИРЖА ТРУДА · ФОРУМЫ · · Zbio-wiki

Среды и пищевые добавки

Инструкция по работе с прописями растворов откроется в новом окне при нажатии на эту кнопку:


    Среды

    LB, LTB

    pH 7.0; p=1.024



    Ñòîê100ml150ml200ml300ml600ml750ml
    1.Бакто-триптонòâ.1g1.5g2.0g3.0g6.0g7.5g
    2.Бакто-дрож. экст.òâ.0.5g0.75g1.0g1.5g3.0g3.75g
    3.NaClòâ.1.0g1.5g2.0g3.0g6.0g7.5g
    4.H2OmQ95.3g143g190.7g286g572g715g
    5.агар верх.òâ.0.65g0.98g1.3g1.95g3.90g4.88g
    6.агар ниж.òâ.1.5g2.3g3.0g4.5g9.0g11.3g
    7.NaOH10N16.7µl25µl33.4µl50µl100µl125µl
    8.MgSO41M1ml1.5ml2.0ml3.0ml6.0ml7.5ml

    LTB: п.1, 3, 4, 7, 8.
    LB: п.1, 2, 3, 4, 7.
    LB/Mg: п.1, 2, 3, 4, 7, 8.

  • агар (как верхний, так и нижний) нужно смешать сразу после автоклавирования, иначе он застынет как неоднородная субстанция: внизу существенно более концентрированный, чем вверху.

  • LB (низкосолевой)

    для работы с Zeocine pH 7.0

    Ñòîê100ml150ml200ml300ml600ml750ml
    Бакто-триптонòâ.1g1.5g2.0g3.0g6.0g7.5g
    Бакто-дрож. экст.òâ.0.5g0.75g1.0g1.5g3.,0g3.75g
    NaClòâ.0.5g0.75g1.0g1.5g3.,0g3.75g
    H2OmQ95.3g143g190.7g286g572g715g
    NaOH10N16.7µl25µl33.4µl50µl100µl125µl

    M9

    10x

    Êîíö.Ñòîê50ml75ml100ml
    Na2HPO4x 12 H2O48mM358.14g/M8.60g12.90g17.19g
    KH2PO422mM136.09g/M1.50g2.25g3.00g
    NaCl8.5mM58.44g/M0.25g0.38g0.50g
    NH4Cl18.7mM53/49g/M0.50g0.75g1.00g

    Среда M9:

    Êîíö.Ñòîê100ml150ml200ml
    M91x10x10ml15ml20ml
    Глюкоза0.4%10%4ml6ml8ml
    H2O mQ86ml129ml172ml

    + добавки:

    тиамин1mM1M100µl150µl200µl
    MgSO41mM1M100µl150µl200µl
    CaCl20.1mM1M10µl15µl20µl
  • для заливки чашек добавить агар до 3%.
  • NZY

    1 L200ml
    NZ aмин10g2g
    NaCl5g1g
    Бакто-дрож. экст.5g1g
    MgSO4xH2O2g0.4g
    H2O950ml190ml

    SOC, SOB

    (õðàíèòü ïðè NT).

    Ñòîê200ml400ml
    Бакто-триптон 4.0g8.0g
    Бакто-дрож. экст. 1.1g2.2g
    NaCl5M0.4ml0.8ml
    KCl1M2.0ml4ml
    H2O ~196ml~391ml
    1. автоклавировать, охладить до <60oC;
    2. добавить
    3. 0.01V 2M Mg2+{= 1M MgCl2 + 1M MgSO4}  
      0.01V 2M glucose;  

    4. фильтровать через 0.2µm фильтр;
    5. аликвотить, õðàíèòü ïðè -20oC, (-70oC).

    SOB получается, если не добавлять глюкозу.

    Terrific Broth

    pH 7.0

    100ml150ml200ml300ml667ml
    Бакто-триптон1.2g1.8g2.4g3.6g8.0g
    Бакто-дрож. экст.2.4g3.6g4.8g7.2g16.0g
    Глицерол0.4ml
    0.504g
    0.6ml
    0.757g
    0.8ml
    1.009g
    1.2ml
    1.513g
    2.667ml
    3.362g

    H2O до V90ml135ml180ml270ml600ml
    автоклавировать, затем добавить
    KPO4, pH7.0 1.0M10ml15ml20ml30ml66.7ml

    YENB

    pH 7.5; (безсолевая среда для приготовления электрокомпетентных клеток).

    Êîíö.Ñòîê0.45 L0.5 L0.9 L1.0 L
    Бакто-дрож. экст.0.75%òâ.3.4g3.75g6.75g7.5g
    Nutrient Broth0.8%òâ.3.6g4.0g7.2g8.0g
    NaOH 10N~243 µl~270 µl~490 µl~540 µl

    2 YT

    %(w/w)200ml1L
    Бакто-триптон1.63.2g16g
    Бакто-дрож. экст.1.02g10g
    NaCl0.51g5g
    H2O96.9193.8ml969ml




Смотри также:
/ссылки на сетевые ресурсы/
  • Difco Manual On-Line - не только рецепты и советы по применению, но и монографии об истории и основных принципах составления питательных сред (сейчас - 11ое издание). Можно просматривать отдельные главы или скачать целиком с сайта "Becton, Dickinson and Company" - владельца Difco. /ссылку прислал Гаязов Ренат/
  • Рецепты микробиологических питательных сред на сайте Отделения "Питательные среды" Государственного научного центра прикладной микробиологии. /ссылку прислал Гаязов Ренат/


    Пищевые добавки

    IPTG

    C6H18O5S; Mw=238.3g/M;

    Êîíö.1ml5ml10ml
    IPTG200mg/ml0.2g1.0g2.0g
  • Стерилизовать фильтрованием.
  • Хранить 4oC (сухой),-20oC (раствор в H2O);
  • - для плазмид - на чашку ~4µl,
    - для М13 - на 3 ml верхнего агара ~1-4µl.

    X-Gal

    C14H15BrClNO6 Mw= 408g/M;

    Êîíö.1ml5ml10ml
    X-Gal20mg/ml (2%)20mg0.1g0.2g
  • хранить 4oC в темноте (сухой); -20oC в темноте (раствор в DMFA (либо DMSO c эквивалентным результатом)).
  • - для плазмид - на чашку 40µl,
    - для М13 - на 3ml верхнего агара 40µl.

    Глюкоза

    C6H12O6 Mw=180.16;

    Êîíö.Ñòîê5ml10ml50ml100ml150ml200ml
    C6H12O61M180g/M0.90g1.80g9.01g18.02g27.03g36.03g
  • стерилизовать фильтрованием.
  • Мальтоза.

    100x раствор для бактериофага лямбда;

    Êîíö.Ñòîê10ml50ml100ml
    Maltose20%òâ.2g10g20g
  • стерилизовать фильтрованием.
  • Тиамин

    Vitamin B1 Aneurine; C12H17ClN4OSxHCl; Mw=337.3g/M;

    Êîíö.Ñòîê1ml5ml10ml25ml
    C12H17ClN4OSxHCl1M337.3g/M0.337g1.69g3.37g8.43g
  • стерилизовать фильтрованием.


MolBiol.ru: http://molbiol.ru
e-mail: redactor@molbiol.ru
просмотров: 68017
Дата последней модификации: 30/07/13

ГЛАВНАЯ · ПРОЕКТ · СПРАВОЧНИК · МЕТОДЫ · РАСТВОРЫ · РАСЧЁТЫ · ЛИТЕРАТУРА · ЗАДАЧИ · FULL TEXT · ОРГ.ВОПРОСЫ · WEB
ФИРМЫ · КАРТА САЙТА · COFFEE BREAK · КАРТИНКИ · РАБОТЫ И УСЛУГИ · БИРЖА ТРУДА · ФОРУМЫ · · Zbio-wiki

 ·  Викимарт - все интернет-магазины в одном месте  ·  Доска объявлений Board.com.ua  · 
--- сервер арендован в компании Hetzner Online, Германия ---
--- администрирование сервера: Intervipnet ---

molbiol.ru  ·  redactor@molbiol.ru  ·  реклама

molbiol.ru - методы, информация и программы для молекулярных биологов   Rambler