MolBiol.ru > Методы > Макро-методы > Picking | |
|
ГЛАВНАЯ ·
ПРОЕКТ ·
СПРАВОЧНИК ·
МЕТОДЫ ·
РАСТВОРЫ ·
РАСЧЁТЫ ·
ЛИТЕРАТУРА ·
ЗАДАЧИ ·
ФИРМЫ ·
Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
|
Перенос индивидуальных бактериальных колоний в 384 луночную плашку - picking
В чашку поместить 12 стеклянных шариков. Необходимое количество бактерий (для робота "MEDUZA" ~1000 клонов; для "QBOT" ~400) развести в 2ml 2xYT (или LB), раскапать равномерно по поверхности агара. Распределять (пока не подсохнет) - с помощью шариков, покачивая чашку (нужно трясти энергично, но так, чтобы шарики не подскакивали до крышки. Если библиотека высевается более, чем на одну чашку, то при рассеве лучше пользоваться одним и тем же набором шариков. Чашки индивидуально завернуть в SaranWrap и выложить на 37oС в один слой. Растить до того момента, когда колонии достигнут 0.8mm (Не более!!!, мало того, что колонии будут ближе друг к другу, но ещё и робот хуже работает с большими колониями). Дожидаться, пока колонии станут синими не надо - они посинеют на 4oС. Выложить чашки на +4oС в один слой (иначе "средние" чашки будут ещё долго расти). Чтобы иметь представление о необходимом для spotting времени: на "MEDUZA" с "хороших" чашек (имеется в виду хорошая плотность - примерно 800-1000 клонов на чашку) можно собрать 10 384-плашек за ~1h 40'. Please Choose on Option Sterilisation Time (min): Start Please place the picking gadget securely in the robot head. Cancel OK Calibrate Camera || Test Picking Pins || Calibrate Pins Предварительно положить калибровочную плашку. Робот находит на листе точку, затем перемещает "голову" и сравнивает, как соотносится перемещение "головы" с перемещением картинки, снимаемой камерой. Cancel || Calibrate Axis Jog
Don’t Train Cancel Train Cancel Continue Calibration failed. OK Picking about to comence. Nunc Plate Selection Left Plate #:T All On
Cancel OK
Load...Save...Cancel...OK Pin Height Calibration Cancel OK Cancel Train Cancel Train 19-24 13-18 On Of |
Смотри также: /ссылки на сетевые ресурсы/
|
Picking: Colours: Blue/White; spot parameters - Picksels: (z.B.) Diameter: ca. 8-140 (размер клонов); Microtiter Plate: 384 Treshholds: Right Plate: Centre Frame: 0-180; Blue Threshhold 10; Left Plate: Centre Frame: 0-180; Blue Threshhold 10; Cycles in Bath: 1; Additional Options: First Picking pin: 1; |
ГЛАВНАЯ ·
ПРОЕКТ ·
СПРАВОЧНИК ·
МЕТОДЫ ·
РАСТВОРЫ ·
РАСЧЁТЫ ·
ЛИТЕРАТУРА ·
ЗАДАЧИ ·
ФИРМЫ ·
Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
|