MolBiol.ru > Методы > Геномная ДНК > Выделение из мух (c DEPC) | |
|
ГЛАВНАЯ ·
ПРОЕКТ ·
СПРАВОЧНИК ·
МЕТОДЫ ·
РАСТВОРЫ ·
РАСЧЁТЫ ·
ЛИТЕРАТУРА ·
ЗАДАЧИ ·
ФИРМЫ ·
Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
|
Выделение DNA из мух c DEPC
Дополнения, комментарии, вопросы мух /02.06.2005 13:28/
очень хочется чтобы протокол был более полным мух /02.06.2005 13:28/
очень хочется чтобы протокол был более полным Гость /14.07.2008 09:45/
Протокол, который я использую при сходном составе буферов. 1. Поместить одну-несколько мух (можно - любые другие организмы, которые можно легко растереть пестиком в пробирке; спиртованный материал - предварительно подсушить) и залить 200 мкл "рабочего раствора". 2. Гомогенизировать содержимое пробирки. 3. Инкубировать при 65 град. 30 мин. 4. Добавить 300 мкл 5М/3М Ацетата калия (3М ацетата калия + 2М - уксусной кислоты). Перемешать. 5. Инкубировавть на льду 30 мин. 6. Перемешать; центрифугировать 10 мин при 13 тыс об/мин. 7. Перенести супернетант в новую пробирку. 8. Добавить равный объём 96% этанола (500 мкл). 9. Перемешать. Оставить на столе на 5-10 мин. 10. Центрифугировать 10 мин 13 тыс об/мин. 11. Удалить супернатант. Добавить 96% этанол (400 мкл). 12. Перемешать, так, чтобы осадок не при этом не оказался прилипшим к части пробирки не смачиваемой спиртом. Оставить на столе на 3-5 мин 13. Центрифугировать 3-5 мин при 13 тыс об/мин. 14. Тщательно отобрать спирт. 15. Подсушить осадок в пробирках, оставив их открытыми в микротермостате при 37 град не менее 20 мин. 16. Растворить в 50 мкл воды. При таком выделении ДНК может существенно (для ПЦР) деградировать при хранении более 6 мес при 4 град. watchesbiz /04.01.2022 18:45/
|
Смотри также: /ссылки на сетевые ресурсы/
|
ГЛАВНАЯ ·
ПРОЕКТ ·
СПРАВОЧНИК ·
МЕТОДЫ ·
РАСТВОРЫ ·
РАСЧЁТЫ ·
ЛИТЕРАТУРА ·
ЗАДАЧИ ·
ФИРМЫ ·
Хеликон · Диаэм · ИнтерЛабСервис · Beckman Coulter · SkyGen · ОПТЭК · BIOCAD · Евроген · Синтол · БиоЛайн · Sartorius · Химэксперт · СибЭнзим · Tecan · Даниес · НПП "ТРИС" · Биалекса · ФизЛабПрибор · Genotek · АТГ Сервис Ген · Биоген-Аналитика
|