Всем добрый день! Вопрос в следующем. Планирую окраску своего объекта (полихета) антителами к ацетилированному тубулину. Попробовала стандартным для нашей лабы методом (окраска и первичными, и вторичными антителами на +4 overnight, в стандартном PBS с Tween и блоком), окрасилось очень слабо, только реснички, такое впечатление, что антитела практически не попали внутрь.
Судя по статьям, все красят этого червя по следующему протоколу - первичные антитела на 24 ч RT, вторичные антитела на 48 ч RT. При этом в буфер добавляют Тритон (до 1%) и BSA, что понятно, и сахарозу от 5% до 10%. Вот присутствие сахарозы в буфере мне совсем непонятно. Кто-нибудь знает, что она тут делает? Спасибо.