molbiol.ru -> Методы

> Все форумы > Тематические форумы > Молекулярная и клеточная биология

Zbio-wiki

NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ

Правила FAQ* Поиск* Участники* Календарь* Избранные темы* Форум Форумов*

Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ]

Форум:

* Методы -- comments to a permanent page of the site --

Тема связана с: Методы
Операции: Хочу стать куратором* · Подписаться на тему* · Отправить страницу по e-mail · Версия для печати*
Внешний вид:* Схема · [ Стандартный ] · +Перв.сообщ.

страницы (6): 1 2 3 > »

Forum robot
Постоянный участник
на сервере в Москве

26.05.2005 04:46

URL #1

Протоколы экспериментов на сайте molbiol.ru. Работа с бактериями. Выделение pDNA. Получение одноцепочечной DNA. Работа с фагом лямбда. Электрофорез. Выделение ДНК из агарозного геля. Клонирование. Олигонуклеотиды. PCR. Cиквенс. Выделение DNA из эукариот. Работа с RNA. Библиотеки. Работа с белками. Экспрессия белков. Работа с культурами эукариотических клеток. Иммуногистохимия и in situ гибридизация. Макро-методы. Получение серийных делеций. Анализ профилей экспрессии. Работа с Drosophila melanogaster.

Поблагодарили (2): Xrissa, kira12

Гость
IP-штамп: fr/eFUcux3Q2c
гость

09.06.2005 12:58

URL #2

Окраска гликопротеинов по Шиффу с помощью алцианового синего.

Гели фиксируют 30 мин в 12.5%-ной ТХУ, ополаскивают дистиллированной водой и помещают на 50 мин в 1%-ный раствор иодной кислоты (HIO3) в 5%-ной уксусной кислоте. Избыток периодата удаляют, промывая гели несколько раз дистиллированной водой. Затем их погружают на 30 мин в 0,5%-ный раствор метабисульфита натрия, опять промывают дистиллированной водой и помещают в водный раствор, содержащий 0,5% алцианового синего и 3% уксусной кислоты. Через 4 ч фон обесцвечивают 7%-ной уксусной кислотой.

Поблагодарили (4): MariaF, AnKri, Le0nar, Нереидка

xsana

23.09.2005 15:10

URL #3

есть вопросик, народ кто имел счастье работать с красителем Хехста (bis-benzimide)? поделитесь опытом, пожалуйста!

гость: m
IP-штамп: frM.OGd33xfA6
гость

24.09.2005 13:22

URL #4

(xsana @ 23.09.2005 15:10)

есть вопросик, народ кто имел счастье работать с красителем Хехста (bis-benzimide)? поделитесь опытом, пожалуйста!

Мне приходилось работать. А что Вас конкретно интересует?

abitur

20.11.2005 13:22

URL #5

Кто лигирует по тупым концам? Как влияет ПЭГ?

Redactor
admin.
Берлин, Германия

20.11.2005 14:27

URL #6

(abitur @ 20.11.2005 11:22)

Кто лигирует по тупым концам? Как влияет ПЭГ?

Если фрагменты - то очень хорошо; а если надо прицепить адапторы, то адапторов как не было -- только что обожглись.

Гость
IP-штамп: frl40BbmgYAq.
гость

22.11.2005 14:24

URL #7

Граждане,
Кто-нибудь работает с DNA methylation? Есть задача посмотреть метилирование промоторов нескольких генов. Кто-нибудь может помочь советом, а лучше протоколом :)))? Предполагается использовать бисульфидный метод.
Заранее благодарю за отзывчивость!
В свою очеледь могу поделиться опытом по методу задержки в геле (ретардация).
pivelena

Regina

02.12.2005 16:36

URL #8

Коллеги! поделитесь методикой проверки специфичности фосфотирозиновых антител

Sergey S
Участник
Москва

20.12.2005 15:22

URL #9

Уважаемый редактор,
хотел бы выложить в раздел методику по иммунопреципитации хроматина. Как это можно сделать?
Спасибо.

Redactor
admin.
Берлин, Германия

20.12.2005 17:49

URL #10

(Sergey S @ 20.12.2005 13:22)

Можно прислать методику на redactor@molbiol.ru
Вам спасибо!

_Dimych_
IP-штамп: frftLGqhpFF.A
гость

11.01.2006 02:14

URL #11

Французский сайт форезных причиндалов. Содержит этакий учебник по всяким видам форезов (на аглицком), может быть вполне полезен начинающим, а может и не только. К сожалению, весь текст в виде графики выложен. В какой раздел складывать я не знаю.

http://www.apelex.fr/anglais/applications/cadre.htm

_Dimych_
IP-штамп: frftLGqhpFF.A
гость

11.01.2006 20:59

URL #12

На этом сайте довольно много полезной индормации по разнообразным коммерческим ферментам, как то мол.веса, коеффициенты екстинции, оптимумы активности, условия определения активности и прочая фигня.

http://www.worthington-biochem.com/index/manual.html

kozlovaolya

02.02.2006 11:38

URL #13

Уважаемые коллеги!Поделитесь, пожалуйста, методами определения активности фосфолипазы С в нервной ткани. Заранее благодарна Вам.

comp3v
Постоянный участник
Москва

02.02.2006 13:10

URL #14

(_Dimych_ @ 11.01.2006 00:14)

Французский сайт форезных причиндалов. Содержит этакий учебник по всяким видам форезов (на аглицком), может быть вполне полезен начинающим, а может и не только. К сожалению, весь текст в виде графики выложен. В какой раздел складывать я не знаю.
http://www.apelex.fr/anglais/applications/cadre.htm

это есть в нормальном (текстовом) виде на http://nationaldiagnostics.com/articles.php/tPath/1.

Гость
IP-штамп: froLOOvyV3Njo
гость

08.02.2006 14:01

URL #15

коллеги!У кого хорошо получаются пероксидазные конъюгаты? Поделетесь опытом

Гость
IP-штамп: frkEcw.WEdK1o
гость

12.02.2006 14:35

URL #16

Уважаемые коллеги!
Посоветуйте, пожалуйста, что делать, если не получается нормальный сиквенс ПЦР-продукта с автоматического сиквенатора? С самим ПЦР-продуктом всё в порядке (контроль чистый, после очистки на колонках Wizard на форезе видна 1 чёткая полоса соответствующей длины, то, что удаётся прочесть(200-300 нт максимум) соответствует предполагаемой последовательности). С праймерами тоже всё должно быть в порядке, т.к. не так давно с них был отсеквенирован другой продукт и всё было в порядке, читалось по 500-700 нт. Я уже переделывала пару раз продукт - но безрезультатно. Единственное, что могу предположить - может быть при очистке не полностью уходит ЭДТА из ТАЕ буфера и полимераза плохо работает. Может ли влиять на сиквенс, скажем, длина продукта? (Почему-то пока я сиквенировала продукты до 1000нт всё было нормально). Если кто-нибудь даст дельный совет, буду очень благодарна!

анжелла

15.02.2006 10:09

URL #17

подскажите методику определения Тх1 и Тх2 :цонфусед:

Redactor
admin.
Берлин, Германия

15.02.2006 16:04

URL #18

Вообще-то такие вопросы, как выше лучше задавать на форуме в отдельных темах

Olena Bilyk

22.02.2006 23:01

URL #19

Могу поделиться опытом по иммуногистохимии. Кто желает пишите
Лена

Гость
IP-штамп: frVZHJUOacHac
гость

03.03.2006 21:41

URL #20

Парочка вопросов по белковой химии, имеющих, можно сказать, "жизненно важное" для "дисера" значение:
Люди! Встречал ли кто-нибудь методику экстракции белков бактериального s-слоя, не разрушающую саму клетку (клеточную стенку, внешнюю мембрану и т.д.)?
А также методику отделения полисахаридной части гликопротеина от непосредственно белковой?

Всем, кто поможет - заранее большущее спасибо!

bagant

04.03.2006 00:03

URL #21

Коллеги, кто нибудь знает методику приготовления из полиакриламида линейного полиакриламда?

Гость
IP-штамп: frs2D3cyQBxRc
гость

16.03.2006 17:51

URL #22

Коллеги! У меня есть одни вопрос. Есть ли у кого-нибудь протокол хромотографии на протеин G сефароза? Очень нужно.

vesanna

22.03.2006 11:13

URL #23

Я больше химик, чем биолог, но так получилось, что работаю теперь с физической биохимией, а методы молекулярной биологии применять нельзя - "чужая" работа и "кормит" других :).
Тематика:полипептиды, полисахариды, вещества средней молекулярной массы, токсины.Обращайтесь vesanna@rambler.ru.
Занимаюсь углеродными гемосорбентами, гемосорбцией.
Если что, буду рада информации по работе с крахмалом, желатином (желатинолем).
Имею много лит. сводок по тематикам.
Подскажите какие маркеры с высокой молекулярной массой Вы знаете?

uzbek

24.03.2006 14:41

URL #24

Коллеги! Занимался ли кто нибудь конъюгацией пероксидазы хрена с моноклональными антителами человека для твердофазного ИФА. Поделитесь опытом!

Guest
IP-штамп: fra6xdMWXgbHc
гость

30.03.2006 19:48

URL #25

Скажите пожалуйста, какие скорости при упаковке Bio-Rex 70, нанесении и элюции?

Гость
IP-штамп: frDQwa9k7riYg
гость

07.04.2006 16:28

URL #26

Люди! Кто гонял пааг рнковые гели, подскажите, почему образцы не входят в гель, а остаются полосочкой в самом начале дорожки? гель 5%, время 1-2 часа, образцы-клеточная РНК из E.coli различной концентрации

Гость
IP-штамп: frRAbmeRhS4Qw
гость

18.04.2006 16:25

URL #27

Коллеги! Кто знает что нибудь о камерах для электрослияния при получении гибридом. С ПЭГом че то не прет. Помогите!

Гость
IP-штамп: frTITTs62W.JQ
гость

09.05.2006 14:42

URL #28

Народ, срочно нужна методический протокол твердофазного иммуноферментного анализа фитогормонов растений.

A Chemist
Постоянный участник
Минск

09.05.2006 18:32

URL #29

протокол твердофазного иммуноферментного анализа фитогормонов растений

Не хочу Вас огорчать в День Победы, но, боюсь, тако(й)го нет в природе.

Твердофазный ИФА, как правило, это высокоспецифичный метод анализа, потому для каждого конкретного вещества (например, фитогормона) придется разрабатывать индивидуальный набор: получать антитела, иммунный (аффинный) сорбент, конъюгат фермента с Аг или Ат, а потом оптимизировать протокол.
А если купите набор(ы), то протокол приложат бесплатно.

В общем-то, вопрос Вы задали некорректно. Словосочетание "протокол ИФА" звучит как-то несуразно. Бывает протокол кислотно-основного титрования, определния глюкозы в сыворотке крови, есть даже протокол силанизации стекла, а вот то, что Вы просите... Протокол ИФА - это ведь всегда протокол для конкретного набора реагентов. А в общем виде "где возьмешь?", как говорил сами знаете кто.

Сообщение было отредактировано A Chemist - 09.05.2006 18:37

Guest
IP-штамп: frTITTs62W.JQ
гость

10.05.2006 12:29

URL #30

Уважаемые коллеги ! Большая просьба к Вам поделится методическими рекомендациями
по поводу разделения хлорофил-белковых комплексов ФС1 и ФС2 в условиях нативного
электрофореза.

Krystofer

16.05.2006 13:28

URL #31

Очень нужна методика по выделению ДНК из фиксированых микропрепаратов

Manukhov

Москва

28.05.2006 18:24

URL #32

Коллеги! Если кто нибудь знает как очистить ДНК спермы лосося в больших колличествах - поделитесь опытом. Заранее благодарен.

akapi

07.06.2006 17:56

URL #33

уважаемые коллеги. кто-нибудь занимался иммунизацией крыс? конкретно меня интересуют протоколы получения неспецифического воспаления у крыс, например, подкожно вводят спирт или хлороформ...кто-нибудь владеет знаниями, я только по наслышке. спасибо за внимание:)

Гость
IP-штамп: frUc3IzHqMYlk
гость

09.06.2006 10:20

URL #34

Для гостя от 9 мая. Мы занимаемся ИФА ИУК ЦК и АБК. Давайте адрес, вышлю протоколы (я так понимаю Вы имели в виду просто последовательность действий). Здесь писать слишком долго.

Гость
IP-штамп: frHn0qT1exY4g
гость

27.06.2006 06:18

URL #35

pojaluista pomogite
kak ya mogu naiti programmu kolichestvennogo opredeleniya DHA

borand
Постоянный участник

04.07.2006 11:20

URL #36

необходима методика перикисного окисления липидов!!!спасибо.

Гость
IP-штамп: frw3GfipDY0Lk
гость

05.07.2006 12:23

URL #37

А какая конкретно методика? Их дохрена сейчас. Что определять надо?

Гость
IP-штамп: frw3GfipDY0Lk
гость

05.07.2006 12:24

URL #38

Кто-нибудь проводил микродиализ? Очень нужен метод!!!

Guest
IP-штамп: frstdxeaqBFNU
гость

06.07.2006 12:01

URL #39

Про проточную цитометрию: Срочно надо решить какой цитометр лучше FACSCalibur или EPICS XL. Никто из присустувующих не работал на подобном оборудовании. Знающие люди в отпуске. Help me, pls!!!
Что такое система пробоподготовки и автосемплер?
Можно ли обойтись без них? Насколько это осложнит работу?

Дядя ФАКСер
Постоянный участник
Nothern Maccaronia, Ticinum

06.07.2006 12:42

URL #40

(Guest @ 06.07.2006 10:01)

Ребята, я работал и с тем- и с тем.
Берите Калибур - ибо у него (несмотря на то, что тоже 4 цвета)- не 1 , а 2 лазера - значит можно шире "играться" с комбинациями флуорохромов.
Сисиема пробоподготовки- то бишь samplre preparation workstation - оддельный дивайс для подготовки семплов. Удобен в клинике при работе со стандартными китами.
Автосемплер- "каруселька"- автоматический загрузчик пробирок ( в XL-MCL например).

P.S. Кстати, на Калибуре и сортить можно (есть там такая опция)- но медленно

P.P.S. А для чего вам цитометр нуже? Под какие задачи? Фундаменталка или клиника?

Guest
IP-штамп: frstdxeaqBFNU
гость

07.07.2006 10:00

URL #41

(Дядя ФАКСер @ 06.07.2006 12:42)

P.P.S. А для чего вам цитометр нуже? Под какие задачи? Фундаменталка или клиника?

Спасибо огромное!
Цитометр нужен сейчас для фундаментальных исследований (Клеточный цикл, апоптоз, CD-типирование и др.), в перспективе возможны клинические анализы (только перспектива эта очень далекая...

)

Гость
IP-штамп: frORzW1lkhklU
гость

14.07.2006 15:25

URL #42

Уважаемые коллеги! Будем ОЧЕНЬ признательны, если кто-нибудь подскажет нам, в чем растворить валиномицин так, чтобы соответствующий растворитель не повлиял на функциональное состояние митохондрий.
Заранее благодарим!

Гость
IP-штамп: frTTm0MizSUq6
гость

16.07.2006 16:56

URL #43

Уважаемые коллеги!
Кто-нибудь определял жизнеспособность микроводорослей методом дифференциального окрашивания? Поделитесь опытом!!!

С уважение и надеждой,
Ирина :))

alex233

23.07.2006 00:27

URL #44

Насчет микродиализа вопрос хороший .Мы тоже хотим попробовать определять нейротрансмитеры в моозгах. Если кто его делал не мог бы в 2 словах описать методику.Заранее спасибо.

Apis

28.07.2006 20:33

URL #45

Коллеги, занимался ли кто из вас анализом ДНК пчел или хотя бы любых других видов насекомых, очень нужна информация. Ответьте.

У нас в институте имеется прибор для тонкокапилярного электрофореза фирмы Агилент технолоджист (Германия). Если у кого есть методики
для разгона фрагментов ДНК на этом приборе -сообщите пожалуйста.

Гость
IP-штамп: frVcIL7EFwe1.
гость

02.08.2006 10:38

URL #46

Добрый день. Подскажите, пожалуйста, кто у нас в стране (какой НИИ) занимается вопросом получения белка (спирта) из нетрадиционного материала (опилки, земля и проч.)

Спасибо,
Илья

Гость
IP-штамп: fr2EOIN.SD1no
гость

16.08.2006 19:05

URL #47

Добрый вечер.Кто-нибудь знает что-либо о моделировании повреждения ДНК окислителями?ПОМОГИТЕ!

matveen

31.08.2006 06:40

URL #48

УВАЖАЕМЫЕ КОЛЛЕГИ!помогите пожалуйста, материал о nick-трансляции.Где можно найти? О факторах, которые влияют, возможных ошибках и т.д.Заранее спасибо.

Гость
IP-штамп: frswkCVHxyt0w
гость

04.09.2006 18:26

URL #49

Народ!! помогите советом!!! а может кто и опытом :-)), пожалуйста!!! как можно определить наличие углевода в комплексе белок-углевод (в данном случае - гиалуроновой кислоты), может есть какая-то специфическая реакция, может окраской ПААГ. буду благодарна за любой совет

lkorochkin

06.09.2006 10:42

URL #50

Народ, у кого есть методика по получению культур клеток Drosophila melanogaster поделитесь!

Поблагодарили (1): tinycapers

Кнопка "Транслит" перекодирует
текст из транслита в кирилицу.
Правила перекодировки здесь;
текст в квадратных скобках'[]'
не преобразуется.

Имя:

Отправка сообщений использует JavaScript операции. В вашем броузере не
установлено/отключено выполнение JavaScript программ. Используйте Netscape Navigator
или Internet Explorer (не ранее 3 версии); убедитесь, что выполнение JavaScript
программ разрешено в настройках вашего броузера.