Molbiol.ru | О проекте | Справочник | Методы | Растворы | Расчёты | Литература | Орг.вопросы Web | Фирмы | Coffee break | Картинки | Работы и услуги | Биржа труда | Zbio-wiki NG SEQUENCING · ЖИЗНЬ РАСТЕНИЙ · БИОХИМИЯ · ГОРОДСКИЕ КОМАРЫ · А.А.ЛЮБИЩЕВ · ЗООМУЗЕЙ Темы за 24 часа [ Вход* | Регистрация* ] Форум: | |
Forum robot Постоянный участник на сервере в Москве |
Выделение плазмидной ДНК (максипреп - лизис щелочью). Лучший метод для получения pDNA высокого качества (годится даже для трансфекции). Его преимущества: очень низкая цена, высокая скорость (сравнима только с Qiaprep spin). Источник: Lee SY, Rasheed S. A simple procedure for maximum yield of high-quality plasmid DNA. Biotechniques. 1990 Dec; 9(6):676-9. |
Гость IP-штамп: frNFBHcL2JSwo гость |
|
Redactor admin. Берлин, Германия |
|
Гость IP-штамп: fr4MbcymAiCcU гость |
|
Гость IP-штамп: frmkz51JvFK6w гость |
|
pacak |
Вам может покозаться странным но у нас в лаб. нет амония ацетата, можно ли применят для высаживания ДНК в данном протоколе ацетаты калия или натрия? Надо ли изменить пропорцию соли в растворе для калия и натрия ? Спасибо. пацак |
guest: ммм IP-штамп: frwHRv5zEzGDY гость |
Калия и Натрия можно, лучше калия см Маниатиса. Стандарт для любой ДНК и спирта 0.3М раствор. Для третьего раствора бывают вариации с рН. и Соотношением объемов. |
guest: Глеб IP-штамп: frSrA/q9KZ6P2 гость |
Нет, плазмиде настанет п-ц. Проверено. Была та же проблема, решилась включением промежуточной стадии - очистка хлороформом перед тем как спирт добавлять. Т.к. ваш осадок скорее всего содержит массу всякой шняги, вот и не растворяется. >можно ли применят для высаживания ДНК в данном протоколе ацетаты калия или натрия? Надо ли изменить пропорцию соли в растворе для калия и натрия ? Можно, так и делаем. |
polymerase |
|
guest: mlog IP-штамп: frBnlzIU3yRfM гость |
|
guest: ммм IP-штамп: frwHRv5zEzGDY гость |
Да! Но! Нужно брать много культуру 300-1000мл. Очень высокая примесь РНК. Поэтому нужно РНКазить мощнее чем обычно. |
« Предыдущая тема · Молекулярная и клеточная биология · Следующая тема » |